新生羔羊的肝脏中度或严重肿大,质地柔软、易脆,呈黄褐色或暗红褐色,表面有不规则充血斑,肝实质中有多量灰白色的坏死灶;成年羊病变较轻,肝实质中可见红色或灰白色针尖样坏死点,胆囊壁出血或水肿。
羔羊除肝病变外,皱胃黏膜常有大量的小出血点,小肠和皱胃内容物呈巧克力色,脾脏和淋巴结肿大、水肿,有出血点。
病理组织切片观察,可见肝小叶中心凝固性坏死并向其余的肝实质扩散;坏死灶内有淋巴细胞和嗜中性粒细胞浸润,核内有嗜酸性包涵体或颗粒。年龄较大的动物,肝坏死常局限于个别肝小叶。
【诊断】
根据流行病学、临床表现和剖检变化,即反刍动物出现不明原因发热、大批流产和幼龄动物的大量死亡,剖检具有不同程度的肝脏损害,与发病动物接触的人具有急性发热性变化等可做出初步诊断,结合病原学、血清学和分子生物学等实验室检测手段对该病进行诊断。
1病原学诊断
可通过采集患病动物的全血、肝脏、脾脏和脑等病料组织或样品进行反向被动凝集试验、免疫扩散试验、荧光抗体技术或elisa直接检测病毒抗原。由于感染动物的血样和组织中含有大量病毒,较易分离和鉴定病毒。
裂谷热病毒可在多种细胞中繁殖,一般多用vero细胞和bhk-21细胞,细胞病变一般在24~48h出现,极少数可延长至6d;细胞培养物中的病毒抗原最早可在接种后12h通过荧光抗体技术检查出来。
该病毒还可用全血或组织悬液通过脑内或腹腔接种小鼠分离,病鼠常于出现神经症状后3~8d死亡。分离到的病毒可用中和试验、血凝抑制试验和elisa进行鉴定。
2血清学诊断
可用血凝抑制试验、中和试验、间接荧光抗体技术或elisa进行病毒特异性抗体的检测,辅助诊断。
血凝抑制试验最简便,但特异性不高,需要对血清进行必要的预处理。
中和试验包括微量中和试验、蚀斑减少中和试验、小鼠中和试验,具有高度的特异性,可检查动物群体早期感染,也能进行感染动物与免疫动物的抗体检测,但由于只能使用活病毒进行试验,故不适于非疫区使用。
elisa具有较高的可靠性与灵敏度,是进行rvf早期快速检测的常用方法。
对于无rvf国家,elisa、血凝抑制试验、琼脂扩散试验、荧光抗体技术、补体结合试验、放射免疫技术等方法,均可用于该病毒的检测。
3分子生物学诊断
可用rt-pcr检测病毒rna进行早期诊断,包括巢式rt-pcr、实时荧光定量rt-pcr等。
另外,还可以采用病料匀浆后的上清液作为抗原进行病毒中和试验,利用病毒感染的肝、脾、脑、细胞培养物涂片进行免疫荧光染色,以及用免疫酶技术、免疫扩散试验检查血清中的病毒等。肝的特征性组织病理切片也有利于疾病的诊断。
4鉴别诊断
本病在临床上需与流行性感冒、流行性乙型脑炎、病毒性肝炎、布鲁菌病、q热等发热性、脑炎及病毒性出血热疾病进行鉴别诊断。
血清学诊断时应注意本病毒与白蛉热病毒属中其他病毒成员的血清型交叉反应以及感染动物与免疫动物的鉴别诊断。
【防控】
在非洲等有疫区的国家,裂谷热疫情一经确认,疫区内所有感染动物和疑似感染动物都将全部扑杀,并对尸体进行焚烧、深埋,清除患病动物的分泌物、排泄物,被其污染场所进行消毒等无害化处理。
受威胁区动物实行全部紧急免疫,同时严格控制疫区动物、动物产品以及人员的流通和出入。
受该病威胁国家或地区的易感动物可接种灭活疫苗加以预防。
此外,在疫区开展蚊虫杀灭也是防控该病传播和蔓延的有效手段。为防止该病传入我国,应加强国境检疫,禁止从疫区引进动物及其产品。进口反刍动物及其产品时要严格入境检疫,一旦检出该病,则立即进行扑杀和销毁处理,对相关运输工具要进行隔离与消毒。
同时,在反刍动物倒养密度高且与非洲动物产品贸易来往频繁的地区要加强疫情监测,如发现疑似疫情,及时报告并果断采取控制措施。另外,我国疫控部门应建立针对裂谷热的风险评估机制和应急处置预案。
【公共卫生】
在动物裂谷热疫情暴发地区,常常伴有人感染裂谷热的病例。蚊子叮咬传播是人感染裂谷热的重要途径,但绝大多数人间感染是通过宰杀、接生、兽医诊疗或试验期间接触患病动物的组织、血液、分泌物和排泄物中的病毒所造成的。因此,牧民、农民、鲁医、动物养殖和屠宰工人以及从事病原操作的实验室技术人员等职业人员,是裂谷热病毒感染的高危人群。至今尚无裂谷热在人与人之间传播的报道。
任何年龄段均可感染裂谷热病毒并发病,但儿童发病较少,男性多于女性。人感染裂谷热病毒后表现不一,呈隐性经过或为严重的流感样表现,主要表现为发热、头痛、肌肉痛、关节痛、全身乏力,有时会恶心、呕吐,部分出现结膜炎及畏光现象,病程可持续几天。最常见的并发症是视网膜损伤,严重者可导致暂时性或永久性失明,有时可导致脑炎或出血性肝炎,发展为出血热症候群,伴随黄疸和出血现象,病死率可高达50。裂谷热病毒为三级生物安全防范水平的病原,曾经引起实验室人员的严重感染。因此,凡与患病动物或其病原接触的人员必须提前进行免疫接种;开展病原学研究的人员还应配备呼吸保护装备,在生物安全三级实验条件下进行操作。
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